联系我们 / CONTACT US

侧栏联系我们
公司名称:必威娱乐平台|betway必威娱乐城|betway88客户端
地址:西安市太白小区南区11号楼1单
元2楼西户
Email: xfyangbio@163.com
电话:029-88237772
传真:029-88237772

在线留言 / ONLINE MESSAGE

IHC\ICC\IF(免疫组化)相关betway必威娱乐城

抗鼠/兔通用型免疫组化检测betway必威娱乐城盒(二步法)

发布日期:2015-03-02阅读次数:1059
 
抗鼠/兔通用型免疫组化检测betway必威娱乐城盒
 
1ml    300元
5ml    1300元

产品说明
该免疫组化betway必威娱乐城盒利用最新的聚合技术将多个过氧化物酶(HRP)分子及抗鼠及抗兔免疫球蛋白
(IgG)偶联到多聚物上,形成的聚合物(二抗)具有放大信号增加敏感度、减少非特异性背景特点。
与兔或者鼠一抗进行搭配使用,结合后再与DAB 反应,可得棕色显色。该反应体系不含生物素和链霉
亲和素,不受内源性生物素影响,背景极低;只需要二步反应,即可完成实验过程。
 
产品列表
编号  名称  规格
1  抗兔/鼠HRP标记聚合物  1ml
2  DAB原液  50μl
3  DAB稀释液50×  2.5ml(1.25ml×2) 
  
产品应用
DAB工作液配制:
实验前,将DAB原液与DAB稀释液按照1:50比例配制本次实验所需要的用量,混匀后避光备用。
 
实验步骤:(以石蜡切片染色程序为例)
1) 将石蜡切片脱蜡至水:先将切片置于二甲苯中10分钟,2次。然后依次在100%,95%,80%和60%
乙醇,每级放置5分钟。再用蒸馏水浸洗3次,每次3分钟。
2) 抗原修复:根据抗原抗体情况,必要时对切片进行抗原热修复:加入柠檬酸缓冲液后,将切片放置
微波炉,中火修复2次,每次5分钟。结束后在柠檬酸缓冲液自然冷却,35分钟。然后用TBS冲
洗3次,每次1分钟。
 3) 加入3%H2O2,室温10 分钟以灭活内源性酶。TBS冲洗3次,每次1分钟。
4) 封闭:用TBS制备5%封闭血清,室温 1小时。注意血清来源种属要与二抗来源种属一致。(如无
合适血清,可用PBS(或TBS)制备5%BSA)
5) 孵育一抗:滴加适当稀释的一抗(兔或鼠一抗),37℃1~2 小时或 4℃过夜。TBS冲洗3次,每次
1分钟(一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度
不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
6) 孵育二抗:滴加50-100μL抗兔/鼠HRP标记聚合物,37℃孵育30 分钟,TBS冲洗3次,每次1分
钟。
7) DAB显色: 滴加预制好的显色剂DAB工作液50-100微升,室温孵育5-10分钟, 或者镜下控制反
应时间。蒸馏水洗涤。
8) 苏木素复染2-3分钟,然后蒸馏水冲洗
9) 各级酒精(60-100%)脱水,每级5分钟。取出后置于二甲苯10分钟,2次。用封片胶封片、显微
镜观察。
 
备注:如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复,方法与石蜡切片
2-8步骤相同。
 
产品保存:
该betway必威娱乐城盒应在2-8度保存,并在有效期(一年)内使用,切忌反复冻融。
 
注意事项:
1.在抗原修复及后续免疫组化染色过程中都需避免组织切片干燥,保持湿润;
2.良好染色效果的获得很大程度上取决于标本制备和正确的实验方法,建议每批实验设置阴阳性对
照;
3.本说明书所提供的操作方法仅供参考,如遇特殊情况需要根据实际情况进行调整。